GB5413.18-2010嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測(cè)定內(nèi)容是什么?百檢網(wǎng)檢測(cè)范圍廣泛,可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及項(xiàng)目安排檢測(cè),全國(guó)近千家合作實(shí)驗(yàn)室,CMA/CNAS資質(zhì)齊全,可就近安排寄樣檢測(cè)。今天百檢網(wǎng)就給大家簡(jiǎn)單介紹一下GB5413.18-2010嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容。
1.范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測(cè)定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中維生素C的測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定的是還原型維生素C和氧化型維生素C的總量。
2.規(guī)范性引用文件
本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
3.原理
維生素C(抗壞血酸)在活性炭存在下氧化成脫氫抗壞血酸,它與鄰苯二胺反應(yīng)生成熒光物質(zhì),用熒光分光光度計(jì)測(cè)定其熒光強(qiáng)度,其熒光強(qiáng)度與維生素C的濃度成正比,以外標(biāo)法定量。
4.試劑和材料
除非另有規(guī)定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的三級(jí)水。
4.1 淀粉酶:酶活力1.5U/mg,根據(jù)活力單位大小調(diào)整用量。
4.2 偏磷酸—乙酸溶液A:稱取15g偏磷酸及40mL乙酸(36%)于200m水中,溶解后稀釋至500mL備用。
4.3 偏磷酸—乙酸溶液B:稱取15g偏磷酸及40mL乙酸(36%)于100mL水中,溶解后稀釋至250mL備用。
4.4 酸性活性炭:稱取粉狀活性炭(化學(xué)純,80目~200目)約200g,加入1L體積分?jǐn)?shù)為10%的鹽酸,加熱至沸騰,真空過濾,取下結(jié)塊于一個(gè)大燒杯中,用水清洗至濾液中無鐵離子為止,在110℃~120℃烘箱(5.3)中干燥約10h后使用。
檢驗(yàn)鐵離子的方法:普魯士藍(lán)反應(yīng)。將20g/L亞鐵氰化鉀與體積分?jǐn)?shù)為1%的鹽酸等量混合,將上述洗出濾液滴入,如有鐵離子則產(chǎn)生藍(lán)色沉淀。
4.5 乙酸鈉溶液:用水溶解500g三水乙酸鈉,并稀釋至1L。
4.6 硼酸—乙酸鈉溶液:稱取3.0g硼酸,用乙酸鈉溶液(4.5)溶解并稀釋至100mL,臨用前配制。
4.7 鄰苯二胺溶液(400mg/L):稱取40mg鄰苯二胺,用水溶解并稀釋至100mL,臨用前配制。
4.8 維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL):稱取0.050g維生素C標(biāo)準(zhǔn)品,用偏磷酸乙酸溶液A(4.2)溶解并定容至50mL,再準(zhǔn)確吸取10.onL該溶液用偏磷酸—乙酸溶液A(4.2)稀釋并定容至100mL,臨用前配制。
5.儀器和設(shè)備
5.1 熒光分光光度計(jì)。
5.2 天平:感量為0.1mg。
5.3 烘箱:溫度可調(diào)。
5.4 培養(yǎng)箱:45℃±1℃。
6.分析步驟
6.1 試樣處理
6.1.1 含淀粉的試樣:稱取約5g(*至0.0001g)混合均勻的固體試樣或約20g(*至0.0001g)液體試樣(含維生素C約2mg)于150mL三角瓶中,加入0.1g淀粉酶(4.1),固體試樣加入50mL45℃~50℃的蒸餾水,液體試樣加入30mL45℃~50℃的蒸餾水,混合均勻后,用氮?dú)馀懦恐锌諝?
蓋上瓶塞,置于45℃±1℃培養(yǎng)箱(5.4)內(nèi)30min,取岀冷卻至室溫,用偏磷酸—乙酸溶液B(4.3)轉(zhuǎn)至100mL容量瓶中定容。
6.1.2 不含淀粉的試樣:稱取混合均勻的固體試樣約5g(*至0.0001g,用偏磷酸—乙酸溶液A(4.2)溶解,定容至100mL。或稱取混合均勻的液體試樣約50g(*至0.0001g),用偏磷酸—乙酸溶液B(4.3)溶解,定容至100mL。
6.2 待測(cè)液的制備
6.2.1 將上述試樣(6.1.1,6.1.2)及維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液(4.8)轉(zhuǎn)至放有約2g酸性活性炭(4.4)的250mL三角瓶中,劇烈振動(dòng),過濾(棄去約5mL*初濾液),即為試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液。然后準(zhǔn)確吸取50mL試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液分別置于25mL及50mL放有5.0mL硼酸—乙酸鈉溶液(4.6)的容量瓶中,靜置30min后,用蒸餾水定容。以此作為試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的空白溶液。
6.2.2 在此30min內(nèi),再準(zhǔn)確吸取5.0mL試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液于另外的25mL及50mL放有5.0mL乙酸鈉溶液(4.5)和約15mL水的容量瓶中,用水稀釋至刻度。以此作為試樣溶液及標(biāo)準(zhǔn)溶液。
6.2.3 試樣待測(cè)液:分別準(zhǔn)確吸取2.0mL試樣溶液(6.2.2)及試樣的空白溶液(6.2.1)于10.0mL試管中,向每支試管中準(zhǔn)確加入5.0mL鄰苯二胺溶液(4.7),搖勻,在避光條件下放置60min后待測(cè)。
6.2.4 標(biāo)準(zhǔn)系列待測(cè)液:準(zhǔn)確吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液(6.2.2)0.5mL、1.0mL、1.5mL和2.0mL,分別置于10mL試管中,再用水補(bǔ)充至2.0mL。同時(shí)準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液的空白溶液(6.2.1)2.0mL于10mL試管中。向每支試管中準(zhǔn)確加入5.0mL鄰苯二胺溶液(4.7),搖勻,在避光條件下放置60min后待測(cè)。
6.3 測(cè)定
6.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
將標(biāo)準(zhǔn)系列待測(cè)液(6.2.4)立刻移入熒光分光光度計(jì)的石英杯中,于激發(fā)波長(zhǎng)350nm,發(fā)射波長(zhǎng)430nm條件下測(cè)定其熒光值。以標(biāo)準(zhǔn)系列熒光值分別減去標(biāo)準(zhǔn)空白熒光值為縱坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的維生素C質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
6.3.2 試樣待測(cè)液的測(cè)定
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