SN/T1198-2013轉(zhuǎn)基因成分檢測馬鈴薯檢測方法內(nèi)容是什么?百檢網(wǎng)檢測范圍廣泛，可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測標(biāo)準(zhǔn)及項目安排檢測，全國近千家合作實(shí)驗(yàn)室，CMA/CNAS資質(zhì)齊全，可就近安排寄樣檢測。今天百檢網(wǎng)就給大家簡單介紹一下SN/T1198-2013轉(zhuǎn)基因成分檢測馬鈴薯檢測方法標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容。

1 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了馬鈴薯及其加工產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分檢測的PCR方法和實(shí)時熒光PCR方法。

本標(biāo)準(zhǔn)的篩選檢測適用于馬鈴薯及其加工產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分的定性檢測。

本標(biāo)準(zhǔn)的鑒定檢測適用于馬鈴薯EH92-527-1實(shí)時熒光PCR的品系鑒定。

2 規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不哥少的。凡是注日期的引用友件僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其*新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T 19495.2 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測 實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求

GB/T 19495.3 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測 核酸提取純化方法

GB/T 19495.7 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測 抽樣和制樣方法

3 術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1 轉(zhuǎn)基因 transgene

將物種本身不具有的來源于其他物種的功能DA序列通過生物工程技術(shù)，使其在該物種中進(jìn)行表達(dá)，以便使該物種獲得新的品種特征。

3.2 內(nèi)源基因 endogenous gene

在栽培的物種中拷貝數(shù)恒定的、不顯示等位基因變化的基因。該基因可用于對基因組中某一目的基因的定量分析。

3.3 外源基因 exogenous gene

利用生物工程技術(shù)轉(zhuǎn)入的其他生物基因，使該生物品種表現(xiàn)新的生物學(xué)性狀。

3.4 陽性目標(biāo)DNA對照 positive dNa target control

參照DNA或從可溯源的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)提取的DNA或從含有已知序列陽性樣品(或生物)中提取的DNA。該對照用于證明測試樣品的分析結(jié)果含有目標(biāo)序列。

3.5 陰性目標(biāo)DNA對照 negative DNa target control

不含外源目標(biāo)核酸序列的DNA片段?？墒褂每伤菰吹年幮詷?biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

3.6 提取空白對照 extraction blank control

該對照為在DNA提取過程中，以水代替測試樣品完成提取過程所有步驟，用以證明提取過程中沒

有核酸污染。

以不同批次提取的DNA并進(jìn)行多個PCR分析時，在做測試樣品PCR時還應(yīng)同時包括提取空白對照。

4 縮略語

下列縮略語適用于本文件。

AAD： resides outside T-dna

在轉(zhuǎn)座自大腸桿菌Tn7中編碼鏈霉素腺苷酰(基)轉(zhuǎn)移酶的基因

ArabSSUlA： arabidopsis thaliana ribulose- 1，5-bisphosphate carboxylase( Rubisco )small subunit ats lA promoter

擬南芥( Arabidopsis thaliana)的核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶小亞基1A的啟動子

CaMv35S： promoter from cauliflower mosaic virus

花椰菜花葉病毒35S啟動子

CP4 EPSPS： 5-enolpyrulshikimate-3-phosphate synthase 5-enolpyrul shikimate-3-phosphate synthase

來源于農(nóng)桿菌 Agrobacterium sp. Strain ce4的5-莽草酸-3-磷酸合成酶

cry 3A cry3a delta-endotoxin

由Bacillus thuringiensis subsp. Tenebrionis(B.T.T) strain bi256-82的蛋白。這個蛋白具有抗蟲活性，尤其是可以選擇性殺死科羅拉多馬鈴薯甲蟲( Colorado potato beetle larvae)

CTAB： hexadecyl trimethyl ammonium bromide

十六烷基三甲基溴化銨

E9 3’ the 3， non-translated region of the pea ribulose-1， 5-bisphosphate carboxylase small subunit (rbcS)E9 gene

來源于豌豆的核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶E9基因小亞基3’端序列

EDTA： ethylene diamine tetraacetic acid

乙二胺四乙酸

FMV35S： a promoter derived from figwort mosaic virus

玄參花葉病毒35S啟動子

NOS： nopaline synthase terminator

胭脂堿合成酶3’轉(zhuǎn)錄終止子

NPT-II： neomycin phosphotransferase-II

新霉素-3’-磷酸轉(zhuǎn)移酶

oriV： resides outsideT-dna

一個源自農(nóng)桿菌 Agrobacterium的RK2質(zhì)粒的1.3kb的復(fù)制區(qū)域

ori332： resides outsideT-dna

一個源自pBR322質(zhì)粒的1.8kb的片段，其中包含復(fù)制區(qū)域和轉(zhuǎn)移結(jié)合位點(diǎn)bom

PLRVrep： potato leaf roll virus replicase

馬鈴薯卷葉病毒復(fù)制酶

PVYcp： potato Y virus coat protein

馬鈴薯Y病毒外殼蛋白

Tris： 2-amino-2-(hydroxymethyl)-1， 3-propanediol

羥甲基氨基甲烷

UGPase： UDP-glucose pyrophosphorylase

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶

5 防污染措施

檢測過程中防止交叉污染的措施按照GB/T 19495.2 中的規(guī)定執(zhí)行。

6 抽樣與制樣

6.1 抽樣

按照GB/T 19495.7 中規(guī)定的方法執(zhí)行。

6.2 制樣

6.2.1 馬鈴薯塊莖、生薯條、生薯片、植株樣品的制備

對于同一個批次的馬鈴薯塊莖、生薯條、生薯片、植株樣品，把每一個樣品洗凈，在任意部位用小刀切下約1cm3的樣品，用液氮研磨成粉末制成小樣，然后將所有小樣混勻，取1g用于提取DNA。

6.2.2 馬鈴薯淀粉樣品的制備

把每包取樣的120g淀粉充分混合，從中取1g作為小樣，然后將所有小樣在一起充分混勻，取1g用于提取DNA。

…………

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