GB5413.35-2010嬰幼兒食品和乳品中β-胡蘿卜素的測(cè)定內(nèi)容是什么?百檢網(wǎng)檢測(cè)范圍廣泛，可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及項(xiàng)目安排檢測(cè)，全國(guó)近千家合作實(shí)驗(yàn)室，CMA/CNAS資質(zhì)齊全，可就近安排寄樣檢測(cè)。今天百檢網(wǎng)就給大家簡(jiǎn)單介紹一下GB5413.35-2010嬰幼兒食品和乳品中β-胡蘿卜素的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容。

1.范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中β-胡蘿卜素的測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中β-胡蘿卜素的測(cè)定。

2.規(guī)范性引用文件

本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

3.原理

試樣經(jīng)皂化后,使β-胡蘿卜素完全變?yōu)橛坞x態(tài)。用石油醚萃取后,反相色譜法分離,外標(biāo)法定量。

4.試劑和材料

除非另有規(guī)定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。

4.1 α-淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。

4.2 無(wú)水硫酸鈉(Na2SO4)。

4.3 抗壞血酸(C6H8O6)。

4.4 石油醚:沸程30℃～60℃。

4.5 甲醇(CH4O):色譜純。

4.6 乙腈(C2H3N):色譜純。

4.7 三氯甲烷(CHCl3):色譜純。

4.8 正己烷(C6H14):色譜純。

4.9 乙醇:體積分?jǐn)?shù)為95%。

4.10 氫氧化鉀溶液:稱固體氫氧化鉀250g,加入200mL水溶解。臨用前配制。

4.11 β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品。

4.12 β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.12.1 β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(500μg/mL):準(zhǔn)確稱取β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品(4.11)50mg(*到0.1mg),用正己烷(4.8)定容至100mL棕色容量瓶中。

注:β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液需要-10℃以下避光儲(chǔ)存,使用期限不超過(guò)3個(gè)月。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用前需校正,具體操作見附錄A。

4.12.2 β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)中間液(100μg/mL):從β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(4.12.1)中準(zhǔn)確移取10.0mL溶液于50mL棕色容量瓶中,用正已烷(4.8)定容至刻度。

4.12.3 β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)工作液:從β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)中間液(4.12.2)中分別準(zhǔn)確移取0.50、1.00、200、3.00、4.0mL溶液轉(zhuǎn)入5個(gè)100mL棕色容量瓶中,用正己烷(4.8)定容至刻度,得到濃度為0.5、1.0、2.0、3.0、4.0μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。

5.儀器和設(shè)備

5.1 高效液相色譜儀,帶紫外檢測(cè)器。

5.2 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。

5.3 恒溫磁力攪拌器:20℃～80℃。

5.4 離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥5000轉(zhuǎn)/分鐘。

5.5 分析天平:感量為0.1mg。

5.6 氮吹儀。

5.7 培養(yǎng)箱:60℃±2℃。

6.分析步驟

6.1 試樣處理

6.1.1 淀粉類試樣

稱取混合均勻的固體試樣約5g或液體試樣約50g(均*至0.0001g)于250mL三角瓶中,加入1.0g抗壞血酸(4.3),固體試樣需用50mL45℃～50℃的水溶解并混合均勻。加入1gα-淀粉酶(4.1),向三角瓶中充氮后蓋上瓶塞,置60℃±2℃培養(yǎng)箱(5.7)內(nèi)酶解30min。

6.1.2 非淀粉類試樣

稱取混合均勻的固體試樣約10g或液體試樣約50g(均*至0.0001g),置于250mL三角瓶中,加入1.0g抗壞血酸(4.3),固體試樣需用50mL45℃～50℃的水溶解并混合均勻。

6.2 待測(cè)液的制備

6.2.1 皂化:將100mL95%乙醇(4.9)加入到上述試樣溶液中,混勻并加入25mL氫氧化鉀溶液(4.10)混勻,放入磁力棒,充入氮?dú)馀懦隹諝?蓋上膠塞。將1000mL的燒杯中加入約300mL的水,將燒杯放在恒溫磁力攪拌器(5.3)上,當(dāng)水溫控制在53℃±2℃時(shí),將三角瓶放入燒杯中,磁力攪拌皂化約45min后,取出立刻冷卻到室溫。

6.2.2 提取:將皂化液全部轉(zhuǎn)入500mL分液漏斗中,加入100mL石油醚(4.4),輕輕搖動(dòng),排氣,蓋好瓶塞,室溫下震蕩10min后靜置分層,將水相轉(zhuǎn)入另一分液漏斗中按上述方法進(jìn)行第二次提取。合并有機(jī)相,用水洗至近中性。有機(jī)相通過(guò)無(wú)水硫酸鈉(4.2)過(guò)濾脫水。濾液收入500mL燒瓶中,于

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(5.2)上在40℃±2℃的充氮條件下蒸至近干(絕不允許蒸干)。用石油醚(4.4)溶解殘?jiān)⑥D(zhuǎn)移至10mL容量瓶中定容。

從上述容量瓶中準(zhǔn)確移取2.0mL石油醚溶液于10mL螺蓋試管中,在40℃±2℃氮吹儀(5.6)上吹干。向試管中加1.0mL正己烷(4.8),震蕩溶解殘?jiān)?。再將試管以不低?000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心(5.4)10min,取出靜置至室溫后待測(cè)。

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